# 피부감작성시험(h-CLAT)의 위음성 평가를 개선하는 시험법의 개발

동물실험을 포함해 모든 안전성 시험에는 정확한 평가를 가능하게 하는 적용범위가 존재한다. 또한 동물실험대체법의 경우는 인체나 동물시험 결과와의 대응성의 관점에서 위음성(偽陰性 · false negative · 양성임에도 불구하고 시험 결과 음성으로 나타남) 평가와 위양성(偽陽性 · false positive · 음성임에도 불구하고 시험 결과 양성으로 나타남) 평가가 되는 화합물이 반드시 존재한다.

그림1 h-CLAT 개요

특히 배양세포를 이용하는 시험계의 경우 물이나 배지에의 용해성이 큰 과제가 된다. 본고에서는 OECD 독성시험 가이드라인에 수록된 in vitro 피부 감작성시험인 인체 세포주 활성화시험 (Human Cell Line Activation Test, h-CLAT)을 사례로 하는 위음성 평가의 개선에 대해 저자의 검토결과를 소개한다.

h-CLAT는 수지상 세포와 같은 응답성을 나타내는 것으로 알려져 있는 인체 급성 단구성 백혈병 유래 세포주 THP-1 세포의 표면단백질 CD86, CD54 발현 량을 유세포 분석기(flow cytometer)로 측정하는 시험 법이다(그림1). 프로토콜과 평가 기준 등의 자세한 내용은 OECD 독성시험 가이드라인 또는 서적을 참고 하길 바란다¹⁾.

In vitro 피부감작성시험에서 위음성 평가로 되기 쉬운 시험물질의 특성으로 pro/pre-hapten, 난(難)수용성, 휘발성, 약 감작성 등이 있지만 h-CLAT는 난수용성 물질로 위음성으로 평가되는 비율이 높다. h-CLAT에 의한 피부감작성 물질 102 종류를 시험한 결과 17 물질이 위음성 평가로 되는 것이 보고됐다^2)~4).